該試劑盒可測定樣品中的小鼠皮質醇水平，使用純化的小鼠皮質醇抗體包被微量滴定板孔，制成固相抗體，然后將皮質醇加入孔中，并用HRP標記的組合抗體成為抗體-抗原-酶-抗體復合物*洗滌后，加入TMB底物溶液，TMB底物變成藍色在HRP酶催化下，通過添加硫酸溶液終止反應，并在450 nm的波長處用分光光度法測量顏色變化。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中皮質醇的濃度。