上海起發(fā)advancedbiomatrix 5226說(shuō)明書
目錄 #5226
TeloCol ® -10 是 20 mL 的 10 mg/ml I 型牛末端膠原溶液，用于 2D 涂層或 3D 水凝膠。TeloCol ® -10 具有較高的粘度和濃度，可形成牢固的水凝膠。
TeloCol ® -10 牛膠原蛋白溶液源自酸提取工藝，可產(chǎn)生端肽完整的膠原蛋白。TeloCol ® 是 0.01 N HCL 中的可溶性末端膠原蛋白。維持膠原鏈兩端的端肽區(qū)域，即 N 和 C 端肽區(qū)域。
TeloCol ® -10 膠原蛋白是大約 95% 的 I 型膠原蛋白，其余由 III 型膠原蛋白組成。每個(gè)產(chǎn)品包括一個(gè)裝有 20 毫升膠原蛋白溶液的瓶子。該產(chǎn)品的供應(yīng)濃度約為 10 mg/ml。TeloCol ® -10 經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾，并以用戶友好的包裝形式提供，以供使用和儲(chǔ)存。
TeloCol ® -10 非常適合用于表面涂層，為培養(yǎng)細(xì)胞提供薄層制備，或用作固體凝膠。
| 參數(shù)、測(cè)試和方法 | TeloCol ® -10 I 型膠原蛋白 #5226 |
| 滅菌方法 | 過(guò)濾 |
| 提取方法 | 酸-端膠原 |
| 形式 | 解決方案 |
| 包裝尺寸 | 20 毫升 |
| 貯存溫度 | 2-10°C |
| 保質(zhì)期 | 自收到之日起至少 6 個(gè)月 |
膠原蛋白濃度 - 雙縮脲 | 9.0-11.0 毫克/毫升 |
膠原蛋白純度 - 銀染 | > 99% |
| 酸堿度 | 1.9-3.0 |
| 動(dòng)力學(xué)凝膠測(cè)試（分鐘） | < 40 |
| 凝膠形成管測(cè)試（分鐘） | < 40 |
原纖維生成（吸光度單位） | > 0.5 |
電泳圖案 - 考馬斯藍(lán) | 特征 |
| 無(wú)菌 - USP 修改 | 沒(méi)有增長(zhǎng) |
| 內(nèi)毒素 - 鱟 | < 10.0 歐/毫升 |
| 滲透壓 (mOsmo H2O/kg) | < 35 |
| 細(xì)胞附著試驗(yàn) | 經(jīng)過(guò) |
| 來(lái)源 | 牛皮 |
| 水凝膠楊氏模量 E (Pa) | 特征 |
注意：在膠原蛋白和其他溶液的制備和處理過(guò)程中，采用無(wú)菌操作來(lái)保持產(chǎn)品的無(wú)菌性。
涂裝程序
如果需要，將所需體積的 TeloCol ® -10 膠原蛋白溶液從瓶子轉(zhuǎn)移到稀釋容器中。使用無(wú)菌 0.01 N HCl 溶液進(jìn)一步稀釋至所需濃度。輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物，直到材料*混合。典型的工作濃度范圍為 50 至 100 ug/ml。注意：使用這些建議作為指導(dǎo)來(lái)確定適合您的培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳包被條件。
將適量稀釋的 TeloCol ® -10 膠原蛋白添加到培養(yǎng)表面，確保整個(gè)表面都被涂層。
在室溫下孵育，蓋上蓋子 1-2 小時(shí)。吸出任何剩余的材料。或者，在室溫下孵育直至表面干燥。
用無(wú)菌培養(yǎng)基或 PBS 仔細(xì)沖洗涂層表面，避免刮傷表面。
涂層表面已準(zhǔn)備好使用。如果保持無(wú)菌狀態(tài)，它們也可以在 2-8°C 潮濕或風(fēng)干的條件下儲(chǔ)存。
3-D 凝膠制備程序
注意：建議在制備膠原蛋白期間將膠原蛋白和其他工作溶液冷藏并保持在冰上。
注意： TeloCol ® -10 粘度很高，可能難以有效混合。
將 1 份冷凍的 10X PBS 或 10X 培養(yǎng)基緩慢加入 8 份冷凍膠原蛋白溶液中，輕輕旋轉(zhuǎn)。
使用無(wú)菌 0.1 M NaOH 將混合物的 pH 值調(diào)節(jié)至 7.2–7.6。仔細(xì)監(jiān)測(cè) pH 調(diào)節(jié)（pH 計(jì)、酚紅或 pH 試紙）。輕輕旋轉(zhuǎn)混合。
用無(wú)菌水將最終體積調(diào)整到總共 10 份并混合。
為防止凝膠化，將混合物的溫度保持在 2–10°C。
將 TeloCol ® -10 膠原蛋白混合物分配到所需的無(wú)菌板或培養(yǎng)容器中。
要形成凝膠，請(qǐng)加熱至 37°C。等待大約 30 到 60 分鐘形成凝膠。
